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產(chǎn)品簡介

EasyGeno重組克隆試劑盒基于DNA序列同源性進行片段重組，可快速將單個或多個片段定向克隆到任意線性化載體中。通過精心設(shè)計和嚴(yán)格試驗，本試劑盒含有的2×EasyGeno Assembly Mix具有的酶活性可將載體和片段的同源區(qū)域從雙鏈的3’端進行重組連接，最終得到的無缺口閉環(huán)質(zhì)?？芍苯愚D(zhuǎn)化感受態(tài)細胞篩選克隆。該方案克服了酶切位點的限制，僅需在插入片段PCR引物5’端引入線性化載體的末端序列，使得插入片段5’和3’兩端帶有載體兩端的一致性序列（15-25 bp），既可實現(xiàn)插入片段的定向重組進入載體，并可實現(xiàn)多插入片段同時定向重組進入載體。重組反應(yīng)可在恒溫條件下快速進行（50℃處理15 min），配合靈活的PCR產(chǎn)物處理方式和快速轉(zhuǎn)化方法，數(shù)小時內(nèi)即可完成從DNA樣品準(zhǔn)備到重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化涂板培養(yǎng)的全部操作。

圖1. EasyGeno重組克隆流程

產(chǎn)品特點

1. 無需考慮酶切位點限制，通過序列同源性15 min實現(xiàn)載體與片段的快速重組。

2. 插入片段的PCR產(chǎn)物正確且單一，無需純化，可直接與載體進行重組反應(yīng)。

3. 一步反應(yīng)實現(xiàn)1-5個插入片段的定向重組進入任意載體。

4. 基于同源重組原理的片段連接，更適合于高通量的載體構(gòu)建。

EasyGeno重組應(yīng)用方向