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產(chǎn)品簡介

T4 RNA 連接酶2（截短型）可特異性催化5'-P腺苷化的DNA或RNA與RNA的3'-OH連接。本產(chǎn)品不需ATP來發(fā)揮活性，但需要供體底物的5'-P腺苷化。通過對野生型蛋白的截短改造，使得本產(chǎn)品失去了對非腺苷化5'-P的DNA或RNA與RNA3'羥基的連接活性，因此，如果供體5'-P進(jìn)行腺苷化修飾，那么應(yīng)用本產(chǎn)品可特異性的將其連接到受體RNA的3'端，從而可最大限度的減少非目標(biāo)連接產(chǎn)物的背景。本產(chǎn)品通過大腸桿菌重組表達(dá)。包含野生型蛋白的N端249個氨基酸殘基，分子量約為30.5 kDa。

產(chǎn)品特點

1. 特異的催化5'-P腺苷化的DNA或RNA與RNA 3'-OH的高效連接，背景更低；
2. 蛋白比活性高，穩(wěn)定性好。

適用范圍

1. 在二代測序（NGS） 應(yīng)用中， 主要用于miRNA文庫構(gòu)建中RNA的3'端接頭的連接。
2. 5'-P腺苷化的DNA或者RNA標(biāo)簽與任何種類RNA的3'端連接。

單位定義

在1×T4 RNA Ligase 2, Truncated Buffer反應(yīng)液中，20 μl反應(yīng)體系下，37℃，30 min內(nèi)使0.4 μg等摩爾比的5'FAM標(biāo)記的17 nt單鏈RNA與5'腺苷化的18 nt單鏈DNA連接50%時，所需要的酶量定義為1個活性單位（U）。

酶蛋白性質(zhì)描述