自2020年開始，新型冠狀病毒肺炎的疫情就一直牽動著億萬人的心。

新型冠狀病毒傳播方式多樣，除了經(jīng)呼吸道飛沫和接觸傳播的主要途徑外，目前已有報道病毒還可以經(jīng)由氣溶膠、消化道、母嬰等不同方式傳播，傳播渠道多，傳染力強。因此，控制nCov病毒傳播比SARS等以往冠狀病毒傳播更加困難，也是目前感染率居高不下的重要原因之一，早發(fā)現(xiàn)，早隔離，早確診，早治療是本次疫情防控的重中之重。

根據(jù)國家發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（第五版）》，“疑似”和“確診”的含義是：

另一方面，確診除了需要速度，更需要精度，要在最大程度避免假陰性的產(chǎn)生。假陰性不但會造成對個體的錯誤判斷，延誤病情，更有可能造成傳染源的遺漏，造成更大規(guī)模的傳染。假陰性的產(chǎn)生原因主要有以下幾點：

1. 樣本采集不當(dāng)，并未采集到合理位置的標(biāo)本，病毒含量不能反映真實狀況。

2. 樣本保存和處理不當(dāng)，造成處理過程中病毒RNA降解。

3. 提取效率低，病毒并未完全提取，或提取過程中病毒降解。

4. 檢測分辨率低，檢測下限過高，導(dǎo)致無法檢出病毒。

5. 實驗員操作不當(dāng)。

由此可見，無論是RT-qPCR檢測步驟，還是檢測之前的病毒核酸提取的步驟，都要最大程度的避免產(chǎn)生假陰性。

樣本準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)的樣本類型，規(guī)范的樣本采集、處理和運輸，是避免假陰性的第一步。雖然已有報道病毒會通過糞口等其他方式傳播，但目前世界衛(wèi)生組織（WHO）的最新資料表明，呼吸材料（鼻咽和口拭子、痰液、肺泡灌洗液等）和血清樣本是檢測nCov的標(biāo)準(zhǔn)。WHO給出的臨時指導(dǎo)中，樣本類型、采集和儲運的方式如下（Laboratory testing for 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) in suspected human cases）：

核酸提取

在核酸提取層面，避免假陰性最重要的就是要提高核酸的得率。提高得率的難點有三：1. 上述樣本不屬于培養(yǎng)細(xì)胞等簡單醫(yī)療樣本，樣本類型多，成分復(fù)雜，雜質(zhì)含量高，對樣本裂解效率有很大影響。2. 病毒含量較低，相應(yīng)的對提取效率的要求就很高，要求提取得率盡量高，能夠滿足后續(xù)檢測的要求。3. 樣本中RNA酶會在提取過程中導(dǎo)致病毒RNA降解。因此，在提取時需選用得率高、純度高的試劑盒。此外，在提取過程中，對操作人員的要求也比較高，在提取之前應(yīng)進行整體培訓(xùn)，避免操作錯誤或引入RNA酶等雜質(zhì)。

定量檢測