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Amicon Amicon Amicon Amicon Ultra Ultra Ultra Ultra 超濾管
Q:我該如何選擇合適的 Amicon Ultra 裝置用于蛋白的濃縮?
A:一般我們推薦選擇的超濾管的標稱分子量為目標蛋白的 1/2 或者 1/3 。
Q:我可以重復(fù)使用超濾管么?
A:所有的離心超濾管都是一次性的,不推薦重復(fù)使用。
Q:Amicon Ultra 超濾管可以用于核苷酸純化與濃縮么?
A:我們推薦 Amincon Ultra 30kDa MWCO 用于基因組和 PCR 濃縮或純化時,因為實驗數(shù)據(jù)顯示該規(guī)格超濾管在核苷酸得率和超濾時間上提供最好的平衡。
Q:如果使用 Amicon Ultra 超濾管,要配什么樣的離心轉(zhuǎn)子?
A:對于 Amicon Ultra-4 ,可容納標準的 15ml 的圓錐管(長: 124mm )的轉(zhuǎn)子,對于 Amicon Ultra-15 ,可容納標準的 50ml 的管子(長: 121mm )的轉(zhuǎn)子
直徑:
Amicon Ultra-4 ,帶蓋: 22.7mm ;不帶蓋: 17.3mm
Amicon Ultra-15 ,帶蓋: 35mm ;不帶蓋: 29.7mm
Q:Amicon Ultrar 超濾管可以用酒精消毒滅菌么?
A:Amicon Ultra 裝置與 70% 乙醇是兼容的,但是我們對滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測試,所以無法提供更進一步的參考信息。
Q:Amicon Ultra 超濾裝置是否可以用于高壓滅菌?
A:不可以, Amicon Ultra 都是采用熱封設(shè)計,不可以用高壓高溫滅菌。
Q:Millipore 是否提供無熱源的超濾裝置?
A:我們提供的超濾裝置均非無熱源的,即使是無菌裝置也可能包含熱源。
Q:Amicon Ultra 超濾管的膜會因為離心時間過長而變干么?
A:不會,因為 Amicon Ultra 有死體積,總會有溶液殘留在濾管中。
對應(yīng)的 dead volume 是:
Amicon 15 : 200ul
Amicon 4 : 50ul:
Amicon 0.5 : 10-20ul
Q:Amicon Ultra 超濾管是否不含 RNA 酶?
A:我們不保證超濾管不包含 RNA 酶,建議您可以用 0.1% DEPC 在 37 度浸泡 2 小時,以完全滅活 RNA 酶。殘留的 DEPC 可以用 Milli-Q 超純水洗滌除去。
Q:攪拌式超濾裝置建議的蛋白濃度范圍是什么?
A:所有的攪拌式超濾裝置建議的濃度范圍為:
最低起始濃度不低于 0.05g%
最高濃縮濃度不高于 10g%
Q:攪拌式超濾裝置是否可以裝上膜進行滅菌處理?
A:可以,但只能和 YM 膜一起配套使用。在裝置中加入少許緩沖溶液保持膜潤濕,旋緊底座再松回 1/4 圈。超濾裝置的管子與其它配件要移除,因為他們不能進行高壓滅菌處理。
Q:攪拌式超濾裝置是否可以用次氯酸鈉清潔?
A:可以,我們推薦 100ppm (萬分之一)次氯酸鈉浸泡 30 分鐘清潔超濾裝置。
Q:我的攪拌式超濾裝置沒有液流流出,為什么?
A:可能性如下
a. 裝置未進氣施壓;
b. 超濾膜裝反,正確安裝方式是使光面朝上;
c. 超濾裝置自帶的塑料夾紙沒有取出;
d. 溶液比較粘稠或濃度太高;
e. 膜支架及濾液口可能堵塞。
Q:攪拌式超濾裝置的使用壓力為多少?
A:8003,8010,8050,8200以及8400的最大操作壓力為75psi ,而 2000 最大操作壓力為100psi 。推薦所有的攪拌式超濾裝置的操作壓力為55psi ,當(dāng) 100kDa 以上的分子量的膜使用時,操作壓力低于10psi 。
Q:我可以使用壓縮空氣代替氮氣罐為攪拌式超濾裝置提供壓力源么?
A:我們不推薦空氣作為壓力源,因為有可能空氣中 CO2 會使產(chǎn)物樣品發(fā)生 pH 變化,也可能會引起產(chǎn)物樣品的氧化。
Q:對于不同分子量的目標蛋白,我該如何選擇合適截留分子量的超濾膜?
A:對于 Ultracel 超濾膜,我們推薦選采用目標蛋白分子量 1/2-1/3 的標稱分子量的膜 ;對于聚醚砜膜 Biomax系列,推薦目標蛋白 1/4-1/5 的標稱分子量的膜。
Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?
A:按照經(jīng)驗,我們推薦兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級( 10 倍)。
Q:圓片超濾膜是否可以反復(fù)使用?
A:是的,圓片超濾膜如果使用、清洗、保存得當(dāng),可以反復(fù)使用多次。
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